Лица, контролирующие вич-инфекцию, характеризуется генетической и иммунологической неоднородностью
За 25 лет изучения вич-инфекции известно немало случаев, когда вич-инфицированные лица остаются бессимптомными с нормальным числом CD4 клеток и неопределяемой вирусной нагрузкой на плазму, несмотря на отсутствие АРТ .
Дизайн исследования :
В 1 группу (n=66) включили лиц, способных к полному контролю вич. ВН у них была либо неопределяемой ( уровень рнк 50 копий/мл), либо эпизоды с повышением ВН до 1000 копий/мл составляли меньшинство. Эту группу назвали «элитные контроллеры» . ( (ЭК) )
Вторая группа (n=60) включала лиц, ВН которых была в пределах 50–2000 копий/мл («виремичные контроллеры» ). ( ВК )
Третью группу (n=30) составили лица с прогрессирующей вич-инфекцией («хронические прогрессоры» ). ( ХП )
Пациенты всех трех групп никогда не получали АРТ.
Генетические исследования включали HLA-типирование и выявление генов CCR5Δ32 и CCR2-64I, которые, как показано ранее, ассоциируются с медленным прогрессированием заболевания. Использовали набор тестов для выявления тех или иных компонентов иммунного ответа, в том числе:
1) определение числа мононуклеарных клеток в периферической крови (sfc/106 мононуклеаров), участвующих в интерферон (IFN)-γ энзим-связаном иммуноспоте (Elispot), что специфично для CD8 Т-клеток при ВИЧ-и;
2) выявление антиген-индуцированного внутриклеточного (в CD4 и CD8) уровня IFN-γ и интерлейкина (IL)-2 методом флоуцитометрии (определение IFN-γ+ и IL-2+ клеток).
В качестве антигенов-индукторов использовали структурные гены ВИЧ - Gag (group-specific-antigens, кодирующий белки сердцевины вируса), Pol (polymerase) и Env (envelope), а также регуляторные гены ВИЧ - Nef, Tat, Rev, Vif, Vpr и Vpu; 3) определение нейтрализующих антител (Nab) - антител к антигенам вич в плазме.
Средний возраст ЭК был 47 (22–75), ВК – 48 (32–67) и ХП – 36 (18–70) лет; длительность ВИЧ-и – 15 (9-22), 17 (13-25) и 5,5 (1-17) лет; мужчины составили 64%, 78% и 80%; белокожие – 54%, 58% и 57% соответственно. Абсолютное число CD4 различалось в трех группах и было достоверно выше у ЭК (884 против 602 и 295 кл/мм3 соответственно). HLA B57 выявлен у 44% ЭК и 33% ВК против 10% ХП, HLA B27 – у 15% и 20% против 3% соответственно. Суммарно все HLA-протективные аллели зарегистрированы у 68% пациентов 1 гр. и 60% 2 гр. (против 37% 3 гр.). Таким образом, примерно 1/3 лиц, контролирующих ВИЧ-и, не имели «защитных» HLA-генов. Гетерогенность контроллеров выявлена и по CCR5 и CCR2 генотипам. Гомозиготы по CCR5Δ32 гену не выявлены ни в одной группе контроллеров, а гетерозиготы встречались у 14% ЭК и у 22% ВК, что не отличалось от средних популяционных значений. Частота гомозигот по CCR2-64I генотипу также не различалась в группах ЭК (1%) и ВК (7%); р=0,84.
ЭК отличались менее выраженным ВИЧ-специфичным ответом CD8 Т-клеток даже по сравнению с ВК. Несмотря на то, что ВИЧ-специфичные IFN-γ+ клетки определялись во всех трех группах, наименьшее их количество было у ЭК (5428 sfc/106 мононуклеаров против 6253 у ВК и 8300 у ХП; р=0,007). В то же время, в группе ЭК зарегистрирован как самый слабый, так и самый сильный ответ Т-клеток (от 500 до 25000 sfc/106 мононуклеаров). Исключение из анализа носителей HLA B57 не повлияло на результаты в группах.
Главной целью иммунного ответа CD8 в группах контроллеров был групповой специфичный антиген ВИЧ - Gag. Положительный Gag-ответ (увеличение 0,01% IFN-γ+ и IL-2+ CD8) был преобладающим в группах ЭК и ВК. Аналогичные результаты были получены, когда из анализа исключили HLA B57-позитивных лиц. Напротив, в группе ХП иммунный ответ на Gag, Pol и Nef был на примерно одинаковом уровне, а ответ CD8 на Env был достоверно выше, чем у ЭК и ВК.
Кроме того, ЭК отличались более высоким удельным весом IFN-γ+ и IL-2+ CD4 клеток (медиана – 0,06% против 0,02% у ВК; р=0,02; и 0,01% у ХП; р=0,02). В группе ЭК также отмечен более высокий процент IFN-γ+ и IL-2+ CD8 клеток (медиана – 0,05% против 0% у ВК, р=0,02; и 0% у ХП, р=0,02). Однако иммунный ответ CD8 клеток, секретирующих только IFN-γ, у ЭК был ниже (0,75% против 1,7% и 2,4% соответственно; р=0,06).
Что касается гуморального ответа, то ЭК и ВК характеризовались выраженной неоднородностью по уровню Nab. В целом, в группе ЭК отмечены значительно более низкие титры Nab против различных штаммов вируса, хотя среди ЭК выявлялись лица как с высокими, так и с минимальными либо нулевыми Nab. Группы ВК и ХП, несмотря на огромную разницу по ВН (РНК ВИЧ 770 против 152000 копий/мл) и CD4, не отличались по уровню Nab (р=0,5).
Выводы :
Лица, полностью контролирующие вич-инфекцию – это особая группа людей, отличающаяся даже от вич-инфицированных лиц с низким уровнем виремии . Внутри группы элитных контроллеров отмечается генетическая и иммунологическая неоднородность. Главное отличие лиц, контролирующих ВИЧ-инфекцию, состоит в том, что иммунный ответ их Т-клеток направлен, прежде всего, против Gag-структурного гена вируса. Несмотря на преобладание среди контроллеров носителей протективных HLA B57 аллелей, преимущественный Gag-ответ был независим от HLA-генотипа. Показано, что для элитных контроллеров характерен более высокий уровень секреции IFN-γ и IL-2 СD4 и CD8 клетками. В то же время, выраженность их иммунного ответа, как клеточного, так и гуморального, колебалась в очень широких пределах, что свидетельствовало о крайней иммунной гетерогенности.
Таким образом, в основе контроля над вич-инфекцией лежит Gag-иммунный ответ. В то же время, приходится констатировать, что ни один из изученных генетических и иммунологических факторов не являлся предиктором контроля над вич .
( translated by bobcat2 10.03.08 )
Оригинальный текст :
http://www.journals.uchicago.edu/doi/abs/10.1086/526786
Дизайн исследования :
В 1 группу (n=66) включили лиц, способных к полному контролю вич. ВН у них была либо неопределяемой ( уровень рнк 50 копий/мл), либо эпизоды с повышением ВН до 1000 копий/мл составляли меньшинство. Эту группу назвали «элитные контроллеры» . ( (ЭК) )
Вторая группа (n=60) включала лиц, ВН которых была в пределах 50–2000 копий/мл («виремичные контроллеры» ). ( ВК )
Третью группу (n=30) составили лица с прогрессирующей вич-инфекцией («хронические прогрессоры» ). ( ХП )
Пациенты всех трех групп никогда не получали АРТ.
Генетические исследования включали HLA-типирование и выявление генов CCR5Δ32 и CCR2-64I, которые, как показано ранее, ассоциируются с медленным прогрессированием заболевания. Использовали набор тестов для выявления тех или иных компонентов иммунного ответа, в том числе:
1) определение числа мононуклеарных клеток в периферической крови (sfc/106 мононуклеаров), участвующих в интерферон (IFN)-γ энзим-связаном иммуноспоте (Elispot), что специфично для CD8 Т-клеток при ВИЧ-и;
2) выявление антиген-индуцированного внутриклеточного (в CD4 и CD8) уровня IFN-γ и интерлейкина (IL)-2 методом флоуцитометрии (определение IFN-γ+ и IL-2+ клеток).
В качестве антигенов-индукторов использовали структурные гены ВИЧ - Gag (group-specific-antigens, кодирующий белки сердцевины вируса), Pol (polymerase) и Env (envelope), а также регуляторные гены ВИЧ - Nef, Tat, Rev, Vif, Vpr и Vpu; 3) определение нейтрализующих антител (Nab) - антител к антигенам вич в плазме.
Средний возраст ЭК был 47 (22–75), ВК – 48 (32–67) и ХП – 36 (18–70) лет; длительность ВИЧ-и – 15 (9-22), 17 (13-25) и 5,5 (1-17) лет; мужчины составили 64%, 78% и 80%; белокожие – 54%, 58% и 57% соответственно. Абсолютное число CD4 различалось в трех группах и было достоверно выше у ЭК (884 против 602 и 295 кл/мм3 соответственно). HLA B57 выявлен у 44% ЭК и 33% ВК против 10% ХП, HLA B27 – у 15% и 20% против 3% соответственно. Суммарно все HLA-протективные аллели зарегистрированы у 68% пациентов 1 гр. и 60% 2 гр. (против 37% 3 гр.). Таким образом, примерно 1/3 лиц, контролирующих ВИЧ-и, не имели «защитных» HLA-генов. Гетерогенность контроллеров выявлена и по CCR5 и CCR2 генотипам. Гомозиготы по CCR5Δ32 гену не выявлены ни в одной группе контроллеров, а гетерозиготы встречались у 14% ЭК и у 22% ВК, что не отличалось от средних популяционных значений. Частота гомозигот по CCR2-64I генотипу также не различалась в группах ЭК (1%) и ВК (7%); р=0,84.
ЭК отличались менее выраженным ВИЧ-специфичным ответом CD8 Т-клеток даже по сравнению с ВК. Несмотря на то, что ВИЧ-специфичные IFN-γ+ клетки определялись во всех трех группах, наименьшее их количество было у ЭК (5428 sfc/106 мононуклеаров против 6253 у ВК и 8300 у ХП; р=0,007). В то же время, в группе ЭК зарегистрирован как самый слабый, так и самый сильный ответ Т-клеток (от 500 до 25000 sfc/106 мононуклеаров). Исключение из анализа носителей HLA B57 не повлияло на результаты в группах.
Главной целью иммунного ответа CD8 в группах контроллеров был групповой специфичный антиген ВИЧ - Gag. Положительный Gag-ответ (увеличение 0,01% IFN-γ+ и IL-2+ CD8) был преобладающим в группах ЭК и ВК. Аналогичные результаты были получены, когда из анализа исключили HLA B57-позитивных лиц. Напротив, в группе ХП иммунный ответ на Gag, Pol и Nef был на примерно одинаковом уровне, а ответ CD8 на Env был достоверно выше, чем у ЭК и ВК.
Кроме того, ЭК отличались более высоким удельным весом IFN-γ+ и IL-2+ CD4 клеток (медиана – 0,06% против 0,02% у ВК; р=0,02; и 0,01% у ХП; р=0,02). В группе ЭК также отмечен более высокий процент IFN-γ+ и IL-2+ CD8 клеток (медиана – 0,05% против 0% у ВК, р=0,02; и 0% у ХП, р=0,02). Однако иммунный ответ CD8 клеток, секретирующих только IFN-γ, у ЭК был ниже (0,75% против 1,7% и 2,4% соответственно; р=0,06).
Что касается гуморального ответа, то ЭК и ВК характеризовались выраженной неоднородностью по уровню Nab. В целом, в группе ЭК отмечены значительно более низкие титры Nab против различных штаммов вируса, хотя среди ЭК выявлялись лица как с высокими, так и с минимальными либо нулевыми Nab. Группы ВК и ХП, несмотря на огромную разницу по ВН (РНК ВИЧ 770 против 152000 копий/мл) и CD4, не отличались по уровню Nab (р=0,5).
Выводы :
Лица, полностью контролирующие вич-инфекцию – это особая группа людей, отличающаяся даже от вич-инфицированных лиц с низким уровнем виремии . Внутри группы элитных контроллеров отмечается генетическая и иммунологическая неоднородность. Главное отличие лиц, контролирующих ВИЧ-инфекцию, состоит в том, что иммунный ответ их Т-клеток направлен, прежде всего, против Gag-структурного гена вируса. Несмотря на преобладание среди контроллеров носителей протективных HLA B57 аллелей, преимущественный Gag-ответ был независим от HLA-генотипа. Показано, что для элитных контроллеров характерен более высокий уровень секреции IFN-γ и IL-2 СD4 и CD8 клетками. В то же время, выраженность их иммунного ответа, как клеточного, так и гуморального, колебалась в очень широких пределах, что свидетельствовало о крайней иммунной гетерогенности.
Таким образом, в основе контроля над вич-инфекцией лежит Gag-иммунный ответ. В то же время, приходится констатировать, что ни один из изученных генетических и иммунологических факторов не являлся предиктором контроля над вич .
( translated by bobcat2 10.03.08 )
Оригинальный текст :
http://www.journals.uchicago.edu/doi/abs/10.1086/526786
2-06-2010 09:46
Россия, Санкт-Петербург
2-06-2010 09:50